بیان پروتئین نوترکیب استرپتولیزین o استرپتوکک پیوژن در باکتری اشریشیاکلی
نویسندگان
چکیده
مقدمه: استرپتولیزین o از جمله پروتئین های ترشحی استرپتوکک پیوژن بوده که دارای قدرت آنتی ژنیک می باشد. امروزه با ردیابی آنتی بادی های ضد این پروتئین روند عفونت ناشی از این باکتری پی گیری می شود. تاکنون تولید نوترکیب این پروتئین با استفاده از ناقلین بیانی دارای پروتئین الحاقی صورت گرفته است. در این تحقیق سعی گردیده تا تولید پروتئین با استفاده از ناقلین بدون پروتئین الحاقی انجام پذیرد. روش کار: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختصاصی و استفاده از روش pcr، ژن استرپتولیزینo از استرپتوکک پیوژن تکثیر گردید. پس از تخلیص، ژن فوق در ناقل پلاسمیدی pet28a جهت بیان کلون گردید. سپس ساختار پلاسمیدی pet28a-slo وارد باکتری اشریشیا کلی سویه bl21- de3-plyss شد. تولید پروتئین با القا توسط iptg و بهینه سازی شرایط صورت گرفت. پروتئین نوترکیب با استفاده از کیتni-nta خالص و میزان پروتئین با استفاده از روش براد فورد اندازه گیری شد. آزمایش وسترن بلات برای تایید پروتئین نوترکیب انجام شد. نتایج: ترادف نوکلئوتیدی ژن تکثیر شده توسط روش pcr با ژن استرپتولیزینo استرپتوکک پیوژن یکسان بود. تولید پروتئین نوترکیب استرپتولیزینo با القا پلاسمید pet28a-slo توسط iptg انجام گردید. تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی و با استفاده از کیت ni-nta انجام شد. میزان پروتئین خالص شده برابر 100 میکرو گرم در میلی لیتر به دست آمد. سرم موش واجد آنتی استرپتولیزین o در روش وسترن بلات با پروتئین تولید شده واکنش داد. نتیجه گیری: تولید پروتئین نوترکیب استرپتولیزین o بدون استفاده از پروتئین الحاقی در میزبان اشریشیا کلی نیز امکان پذیر است. پروتئین تولید شده خاصیت آنتی ژنیک خود را به خوبی حفظ می کند. بنابر این می توان از آن در تشخیص آنتی بادی ضد استرپتولیزین o در بیماران مبتلا به عفونت استرپتوککی استفاده کرد.
منابع مشابه
طراحی روش الایزا جهت سنجش آنتی‌بادی ضد استرپتولیزین- O بر پایه پروتئین نوترکیب استرپتولیزین- O
سابقه و هدف: باکتری استرپتوکوک بتا همولیتیک گروه A اصلی‌ترین عامل عفونتهای گوش و حلق و بینی می‌باشد. عدم درمان یا تاخیر در اقدامات درمانی، منجر به اختلالات جدی مانند تب روماتیسمی حاد و گلومرونفریت می‌شود. اندازه‌گیری آنتی‌بادی ضد استرپتولیزین- O به عنوان یک مارکر در تشخیص این عفونت کاربرد دارد. تهیه استرپتولیزین از محیط کشت باکتری وقت‌گیر و هم‌راه با آلودگی است. در این مطالعه جهت اندازه‌گیری...
متن کاملبیان استرپتوکیناز نوترکیب استرپتوکک گروهA در باکتری اشرشیاکلی
زمینه: استرپتوکیناز A از جمله پروتئینهای ترشحی استرپتوکک پیوژن است که قدرت آنتیژنیک دارد . از این پروتئین میتوان جهت سیال کردن چرک در ذاتالریه و ورم مفصلی چرکی و همچنین به عنوان آنتیژن برای تشخیص عفونتهای استرپتوککی گروه A استفاده کرد. هدف: مطالعه به منظور تولید استرپتوکیناز استرپتوکک گروه A نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی انجام شد. مواد و روشها: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختص...
متن کاملطراحی روش الایزا جهت سنجش آنتی بادی ضد استرپتولیزین- o بر پایه پروتئین نوترکیب استرپتولیزین- o
سابقه و هدف: باکتری استرپتوکوک بتا همولیتیک گروه a اصلی ترین عامل عفونت های گوش و حلق و بینی می باشد. عدم درمان یا تاخیر در اقدامات درمانی، منجر به اختلالات جدی مانند تب روماتیسمی حاد و گلومرونفریت می شود. اندازه گیری آنتی بادی ضد استرپتولیزین- o به عنوان یک مارکر در تشخیص این عفونت کاربرد دارد. تهیه استرپتولیزین از محیط کشت باکتری وقت گیر و هم راه با آلودگی است. در این مطالعه جهت اندازه گیری آ...
متن کاملبیان استرپتوکیناز نوترکیب استرپتوکک گروهa در باکتری اشرشیاکلی
زمینه: استرپتوکیناز a از جمله پروتئینهای ترشحی استرپتوکک پیوژن است که قدرت آنتیژنیک دارد . از این پروتئین میتوان جهت سیال کردن چرک در ذاتالریه و ورم مفصلی چرکی و همچنین به عنوان آنتیژن برای تشخیص عفونتهای استرپتوککی گروه a استفاده کرد. هدف: مطالعه به منظور تولید استرپتوکیناز استرپتوکک گروه a نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی انجام شد. مواد و روشها: در این تحقیق تجربی با طراحی پرایمر اختصاص...
متن کاملبیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترک...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراکجلد ۱۰، شماره ۳، صفحات ۱-۷
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023